产品与服务
类器官活性检测试剂盒
Organoid Vitality Assay Kit
Organoid Vitality Assay Kit 提供了一种利用荧光检测方法分析多孔培养板中的细胞和类器官活力的方案。它是通过检测 细胞代谢能力来评价细胞活力，活细胞可以将试剂盒中的荧光染料还原为红色强荧光的产物（激发波长：560nm；发射波长： 590 nm）；而非活细胞会迅速失去代谢能力，无法还原荧光染料，因此不会产生荧光信号。为了确保检测过程中类器官的活 性，在该试剂盒中还包含了类器官专用的活力检测Buffer。
产品介绍
产品信息
| 组成 | 货号 | 规格（10mL/100mL） | 规格（50mL/500mL） | 保质期 |
|---|---|---|---|---|
| 组份B：活细胞荧光染料（10X） | NGH050002-A | 10mL | 50mL | 4℃，1Year；-20℃，2Year |
| 组份A：类器官活力检测Buffer | NGH050002-B | 100mL | 500mL | 4℃，1Year；-20℃，2Year |
- 组份B：活细胞荧光染料（10X）
- 货号NGH050002-A
- 规格 (10mL/100mL)10mL
- 规格 (50mL/500mL)50mL
- 保质期4℃，1Year；-20℃，2Year
- 组份A：类器官活力检测Buffer
- 货号NGH050002-B
- 规格 (10mL/100mL)100mL
- 规格 (50mL/500mL)500mL
- 保质期4℃，1Year；-20℃，2Year
使用说明
本产品保存温度为4℃时，有效期为1年；保存温度为-20℃时，有效期为2年；为了避免反复冻融，产品第一次使用时，可按照每次使用量的3-5倍体积进行分装；另外，组份A为荧光染料，如分装需避光保存。为了避免反复冻融，产品第一次使用时，可按照每次使用量的3-5倍体积进行分装；另外，组份A为荧光染料，如分装需避光保存。使用前轻柔颠倒几次混匀检测工作液。配置1×类器官活力检测工作液：取组份B（类器官活力检测Buffer）将组份A（活细胞荧光染料，10×）稀释为1×，即为1×类器官活力检测工作液。以检测96孔板整板为例，待检测孔为96个，每孔需要100ul1×类器官活力检测工作液，总共需要9.6mL1×检测工作液；以配置10mL检测工作液为例，需要将9mL组份B与1 mL组份A混合，混合均匀后在120min之内添加并检测。
操作步骤
以96孔板连续检测类器官活力为例，实验操作流程如下：
1. 从培养箱中取出待检测96孔细胞培养板，并尽可能地弃干净待检测孔中的原有完全培养液（a.避免进一步稀释染料；b.避免类器官培养过程代谢产生的物质残留影响染料；c.避免类器官完全培养基中的部分组份影响染料）。
2. 向96孔板待检测孔中沿着侧壁每孔缓缓加入100μL1×类器官活力检测工作液，设置无类器官的孔作为染料阴性对照，放入培养箱孵育30-120min，当培养孔中有细胞或类器官的工作液颜色由蓝色变成粉红色时（如检测细胞量较少，孵育30-120min结束后工作液颜色可能由肉眼可见还是蓝色，因为染料是基于荧光信号的检测，工作液颜色未变为肉眼可见的粉红色并不影响检测结果），可进行下一步。
3. 使用荧光酶标仪（激发Ex/发射Em波长：560(±10)Ex/590(±10)Em）进行检测，记录总荧光强度值。注意：±10代表检测Ex（560nm）/Em（590nm）上下各10nm的波段范围。
4. 检测结束后弃去96孔板中液体，重新加入新鲜的完全培养基，继续培养2天。
5. 重复1）、2）、3）检测步骤，一般来说，正常生长状态的类器官的细胞活力应该随着培养时间延长而持续增加，以检测的总荧光值为例，每2天总荧光值应增加20%以上。
6. 根据总荧光强度值（扣除染料阴性对照）分析类器官的相对活力。