产品与服务

1.配置方式:以配置10mL小鼠结肠类器官完全培养基为例，在9.55mL小鼠结肠类器官基础培养基(NGH010015-C)中加入300uL小鼠结肠类器官培养基补充剂A(NGH010015-A)和150uL小鼠结肠类器官培养基补充剂B(NGH010015-B)，彻底混合。注意:①完全培养基在2-8℃下保存不超过4周，配置完需尽快使用;②小鼠结肠类器官基础培养基已含有杀菌剂和抗生素，无需额外添加。

2.小鼠结肠类器官基础培养基补充剂A(NGH010015-A)和小鼠结肠类器官基础培养基补充剂B(NGH010015-B)采取冰上解冻或者4℃过夜解冻方案。建议首次收货后在无菌条件下根据个人实验需求对培养基补充剂进行合理分装，并将分装放置于-20℃储存，使用前取出解冻，切忌反复冻融补充剂。

1. 组织样品预处理：将组织从组织保存液（NGH030020）中取出，置于60 mm的培养皿中，用含1% PS（青霉素-链霉素）的PBS溶液清洗2-3次，去除表面杂质和污染。清洗完成后，将组织转移至另一个细胞培养皿中备用

2. 样本消化：预处理后的组织用剪刀剪成2mm左右的小块。随后将剪碎的小块转移至15mL离心管中，加入25-50倍组织体积的组织消化液（NGH030021）。置于37℃水浴锅上进行消化，时间控制在50-65min之间，每15min用1ml移液器大力度吹打数次，尽量能把组织块撕裂开。50min后，如果液体特别浑浊，可以终止消化，如果液体不够浑浊，可以再消化15min后吹打。

3. 终止消化并收集细胞：吹打后，加入DMEM（体积为组织消化液的2倍），充分混匀以终止消化反应。将混合液通过100μm细胞筛过滤，收集滤液并在4℃下以200g (rcf) 或1200rpm离心2min。离心后弃去上清液后，1ml的DMEM重悬沉淀，并转移至1.5ml的EP管内，离心10秒，弃上清。根据细胞沉淀量，残留一些DMEM不要吸干净。

4. 种板：根据细胞沉淀量和残留的DMEM，加入3倍体积的基质胶（NGH030024）混匀，种胶于提前预热的孔板中。放置于37℃培养箱中凝固10-15min，取出加入配置完成的小鼠结肠类器官完全培养基（NGH010015）